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==Práctica “Observación de mitosis en células de raíz de ''Sprekelia'' o de cebolla”==


'''Objetivo'''. Mediante el uso de tejido meristemático de cebolla o Sprekelia observar y distinguir algunas fases de la mitosis.


'''Material.'''

-Bulbo de ''Sprekelia''-Cebolla con raíz
                                     
-Microscopio compuesto
                         
-Bisturí
                                                     
-6 porta y cubreobjetos
                           
-Agujas de disección
                               
-Varilla de vidrio con punta roma
             
-Vaso de precipitado de 250 ml

-Probeta de 50 ó 100 ml
     
-Glicerina

-Ácido Láctico

-Ácido Acético

-Alcohol etílico de 96º

-Ácido acético al 30%

-Papel filtro


'''Procedimiento.''' 

Se recomienda utilizar raíz de ''Sprekelia formosissima''.  Es una planta herbácea perenne y bulbosa de la familia Amaryllidaceae  originaria de México y Guatemala, pues forma raíces abundantes y con cromosomas grandes y fáciles de observar al microscopio pero, si no se tiene a la mano, se puede utilizar raices de cebolla.

Si se utiliza la ''Sprekelia'', basta con sacar de la tierra un bulbo de buen tamaño y con abundantes raices, se toman algunas de ellas (las más sanas) y se les corta la punta para proceder a realizar la técnica que a continuación se describe. Si no se cuenta con ''Sprekelia'': A una cebolla en buen estado se le corta la parte basal y se sumerge esta parte en agua para inducir el crecimiento de la raíz, que se producirá entre 3 y cinco días. Se deberá calcular el tiempo de crecimiento para tener las raíces listas el día en que se planea realizar la práctica.

Para iniciar la práctica será necesario primero elaborar el fijador, que se prepara con glicerina, ácido acético, ácido láctico y alcohol etílico de 960 en partes iguales.

El colorante aceto-orceina se prepara de la siguiente manera: en un vaso de precipitado se calientan 45 ml de ácido acético con 55 ml de agua destilada. Se agregan 2 gr de orceina en polvo y se calienta agitando sin permitir que hierva hasta que el volumen original se haya reducido entre un 50 a un 70%. Cuando la solución se enfríe, se filtra y se guarda en refrigeración. 

1. Una vez que la cebolla tenga su raíz, se cortan varias puntas (meristemo apical) aproximadamente de 2 mm de largo y se colocan en la solución fijadora por 24 horas, después de las 24 horas se pueden quedar en la solución hasta que se vayan a utilizar.

2. Una vez cumplidas las 24 horas en la solución, se colocan varias puntas de la raíz en un portaobjetos y se maceran con la varilla de punta roma. Se agrega la aceto-orceina (hasta cubrir las raíces) por 2 minutos

3. Colocar el cubreobjeto sobre las raíces y con el cubreobjetos hacia abajo sobre una servilleta se presiona con el pulgar para que se extienda el material.

4. Coloque nuevamente el cubreobjetos hacia arriba y por capilaridad agregue ácido acético al 30 %.

5. Obsérvense las preparaciones al microscopio para buscar células en alguna fase de la mitosis.

Hacer dibujos de lo observado y comparar con esquemas de libros para identificar las fases.